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免疫細(xì)胞治療臨床研究和相關(guān)產(chǎn)業(yè)
2021年6月22日，復(fù)星凱特CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品益基利侖賽注射液 （又稱阿基侖賽，代號(hào)：FKC876） 已正式獲得批準(zhǔn)。中國(guó)迎來(lái)首款獲批上市的CAR-T細(xì)胞治療產(chǎn)品，也是中國(guó)首款獲批上市的細(xì)胞藥物。除了CAR-T細(xì)胞療法，還有其他免疫細(xì)胞療法，如 CIK 細(xì)胞療法、DC-CIK細(xì)胞療法、NK細(xì)胞療法、TIL細(xì)胞療法和γδT細(xì)胞療法等。 腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康和生命的主要疾病之一，每年全球罹患癌癥的人數(shù)超過(guò)1400萬(wàn)，而死于癌癥的人數(shù)超過(guò)800萬(wàn)。高發(fā)病率和高死亡率在一定程度上反映了臨床上缺少有效防治手段的現(xiàn)狀，這對(duì)腫瘤的預(yù)防和治療提出了挑戰(zhàn)。隨著對(duì)腫瘤認(rèn)識(shí)的不斷深入，腫瘤治療技術(shù)取得了很大的進(jìn)步，顯著改善了整體腫瘤治療效果，但多或少存在副作用大、易產(chǎn)生耐藥性等問(wèn)題。 目前，腫瘤生物免疫治療已成為一種新的治療手段。腫瘤免疫細(xì)胞療法的出現(xiàn)讓人們看到了解決這些問(wèn)題的一絲曙光。 1 免疫細(xì)胞治療臨床研究和產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀 近年來(lái)，隨著國(guó)內(nèi)外政策的放行與大力支持，免疫細(xì)胞治療相關(guān)的各項(xiàng)臨床研究在全球相繼開(kāi)展，細(xì)胞治療的相關(guān)企業(yè)也隨之興起。其中免疫細(xì)胞治療主要有：腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞（TIL）療法、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）療法、樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）療法、DC-CIK細(xì)胞療法、淋巴因子激活性殺傷細(xì)胞（LAK）療法、自然殺傷細(xì)胞（NK）療法等。
免疫細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)，細(xì)胞治療的實(shí)施主體為三甲醫(yī)院；開(kāi)展下游產(chǎn)業(yè)的模式一般有兩種：一種為三甲醫(yī)院自行開(kāi)展此業(yè)務(wù)，另一種為三甲醫(yī)院和企業(yè)合作，企業(yè)提供技術(shù)服務(wù)和支持，醫(yī)院提供臨床平臺(tái)，進(jìn)而實(shí)施治療行為。企業(yè)主要是從事細(xì)胞的擴(kuò)增、制劑研發(fā)，并為科研組織和個(gè)人提供細(xì)胞，從而用于疾病的發(fā)病機(jī)制研究和新藥研發(fā)。他們的盈利模式是通過(guò)為醫(yī)院提供細(xì)胞技術(shù)體系收取服務(wù)費(fèi)和專利費(fèi)，或是為患者提供個(gè)體化治療，再按一定的比例和醫(yī)療機(jī)構(gòu)分享治療費(fèi)用。 國(guó)外代表公司有：Juno Therapeutics、Kite Pharma、諾華集團(tuán)、輝瑞公司、梯瓦制藥工業(yè)有限公司、羅氏集團(tuán)等。 國(guó)內(nèi)代表公司有：中源協(xié)和細(xì)胞基因工程股份有限公司、西比曼生物科技集團(tuán)、深圳市合一康生物科技股份有限公司、博生吉醫(yī)藥科技（蘇州）有限公司、安科生物科技股份有限公司、深圳源正細(xì)胞醫(yī)療技術(shù)有限公司等。國(guó)內(nèi)近年來(lái)的免疫細(xì)胞治療發(fā)展迅猛，但是技術(shù)相對(duì)還不夠成熟，有待進(jìn)一步提高。 CIK與DC-CIK細(xì)胞治療 截至2020年上半年，ClinicalTrials.gov顯示，CIK/DC-CIK細(xì)胞治療的相關(guān)臨床研究有108項(xiàng)。其中非洲1項(xiàng)、東亞87項(xiàng)、歐洲5項(xiàng)、中東1項(xiàng)、北美5項(xiàng)、美國(guó)5項(xiàng)、東南亞4項(xiàng)。涉及的疾病主要包括胰腺癌、胃癌、食管癌、膀胱癌、難治性非霍奇金淋巴瘤、結(jié)直腸癌、肺癌、肝癌、腎癌、三陰性乳腺癌、急性白血病、B細(xì)胞淋巴瘤等實(shí)體瘤和血液瘤。 關(guān)于CIK細(xì)胞治療臨床試驗(yàn)已經(jīng)有很多發(fā)表，CIK細(xì)胞在呼吸系統(tǒng)腫瘤、消化系統(tǒng)腫瘤、泌尿系統(tǒng)腫瘤、乳腺及婦科腫瘤等實(shí)體腫瘤中的臨床研究均有報(bào)道。 Hontscha等對(duì)11項(xiàng)關(guān)于自體CIK過(guò)繼細(xì)胞免疫治療的臨床研究進(jìn)行了Meta分析，結(jié)果顯示自體CIK細(xì)胞治療可明顯提高患者T細(xì)胞免疫功能、改善患者生活質(zhì)量、延長(zhǎng)疾病無(wú)進(jìn)展生存期（PFS）和總生存期（OS），具有良好的療效。一項(xiàng)CIK細(xì)胞作為輔助免疫療法治療肝癌觀察其有效性的Meta分析顯示，CIK細(xì)胞治療組患者存活率顯著高于對(duì)照組；在非隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)中接受CIK細(xì)胞治療的患者PFS較高。Xu等在一項(xiàng)單中心、開(kāi)放、Ⅲ期隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，接受4個(gè)周期的CIK治療后可安全有效地延長(zhǎng)術(shù)后肝癌患者的中位復(fù)發(fā)時(shí)間。一項(xiàng)負(fù)載金納米棒的人CIK用于胃癌的靶向光聲成像、增強(qiáng)免疫治療和光熱治療的研究顯示，體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，金納米棒標(biāo)記的人CIK細(xì)胞在注射后4 h即可通過(guò)光聲成像主動(dòng)靶向和成像胃癌皮下血管，通過(guò)上調(diào)IL-1、IL-12、IL-2、IL-4、IL-17和IFN-γ等細(xì)胞因子使免疫治療效果更強(qiáng)。 常規(guī)治療無(wú)效的晚期癌癥患者的研究顯示，持續(xù)注射DC-CIK可恢復(fù)CD8+細(xì)胞免疫，增強(qiáng)身體活動(dòng)能力，提高臨床療效；DC-CIK聯(lián)合化療治療晚期非小細(xì)胞肺癌的臨床研究顯示，聯(lián)合治療組CD3+CD4+、CD4+/CD8+水平均高于化療組，CD3+CD8+低于化療組，聯(lián)合組客觀緩解率（ORR）、疾病控制率（DCR）均高于化療組，聯(lián)合治療組的不良反應(yīng)顯著低于對(duì)照組，延長(zhǎng)了患者的生存期，顯著提高了患者的免疫功能。此外，DC-CIK聯(lián)合化療加靶向治療顯著提高了晚期結(jié)腸癌患者的疾病控制率，改善了生活質(zhì)量。 NK細(xì)胞治療 截至2020年上半年，ClinicalTrials.gov顯示NK細(xì)胞治療的臨床研究761項(xiàng)。主要分布在東亞196項(xiàng)、美國(guó)213項(xiàng)、北美219項(xiàng)。此外，歐洲71項(xiàng)、東南亞18項(xiàng)、加拿大14項(xiàng)、非洲8項(xiàng)、中東7項(xiàng)、南美6項(xiàng)、日本3項(xiàng)、北亞，墨西哥和太平洋各2項(xiàng)。主要涵蓋了急性髓系白血病、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、惡性膠質(zhì)瘤、B細(xì)胞淋巴瘤、肝癌、胰腺癌、膽管癌等。 臨床研究結(jié)果顯示，將NK細(xì)胞治療與放射治療相結(jié)合，使腫瘤更容易受到NK細(xì)胞細(xì)胞毒活性的影響。最近發(fā)現(xiàn)尤文肉瘤細(xì)胞對(duì)擴(kuò)增的同種異體NK細(xì)胞高度敏感，在原位小鼠模型中，放射治療已被證明能顯著增強(qiáng)NK細(xì)胞介導(dǎo)的對(duì)這些腫瘤的殺傷作用。NK細(xì)胞輸注用于血液系統(tǒng)惡性腫瘤的治療顯示，同種異體NK細(xì)胞具有移植物抗白血病作用，能有效控制血液系統(tǒng)惡性腫瘤。在達(dá)到完全緩解或形態(tài)完全緩解的患者中，過(guò)繼的NK細(xì)胞轉(zhuǎn)移可以顯著延長(zhǎng)無(wú)病進(jìn)展。在報(bào)告的28例患者中，4例完全緩解（CR）持續(xù)約1年，5例CR持續(xù)約1.5年，10例CR持續(xù)約2年。 TIL細(xì)胞治療 截至2020年上半年，Clinicaltrial.gov顯示，TIL細(xì)胞的臨床研究共93項(xiàng)。主要分布在北美34項(xiàng)、美國(guó)33項(xiàng)、歐洲20項(xiàng)。此外，東亞4項(xiàng)、加拿大2項(xiàng)。主要招募宮頸癌、轉(zhuǎn)移黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌、鱗狀細(xì)胞癌、卵巢癌、膽管癌等實(shí)體瘤患者。 在連續(xù)的幾個(gè)黑色素瘤臨床試驗(yàn)中，TIL治療的一致ORR高達(dá)72%，其中10%～20%的治療患者達(dá)到CR，40%的患者獲得持久的臨床反應(yīng)。這些持久的反應(yīng)主要見(jiàn)于在早期達(dá)到CR的患者，而且出現(xiàn)反應(yīng)的機(jī)會(huì)似乎不受先前系統(tǒng)治療進(jìn)展的影響。TIL治療黑色素瘤的令人鼓舞的結(jié)果刺激了世界各地的中心進(jìn)行研究，以重現(xiàn)和優(yōu)化這種治療方法。優(yōu)化的重點(diǎn)是細(xì)胞比例、制備方案和IL-2劑量。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全世界目前有20余項(xiàng)關(guān)于PD-1聯(lián)合TIL治療黑色素瘤的臨床研究，以尋求TIL的治療效果。 關(guān)于TIL過(guò)繼免疫療法的毒性，沒(méi)有4級(jí)副作用［如危機(jī)生命，需要緊急治療，參照常見(jiàn)不良反應(yīng)術(shù)語(yǔ)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)（CTCAE）5.0版］，只有3級(jí)惡心和嘔吐。所有其他不良事件都是1級(jí)或2級(jí)，與IL-2注射有關(guān)，而與TIL無(wú)關(guān)。此外，沒(méi)有觀察到以前經(jīng)歷過(guò)的毒性的任何增加，例如使用伊匹單抗（ipilimumab），在給予聯(lián)合治療時(shí)是一個(gè)高度相關(guān)的發(fā)現(xiàn)。 γδ T細(xì)胞治療 截至2020年上半年，Clinicaltrial.gov顯示，γδT細(xì)胞的臨床研究共18項(xiàng)。其中東亞15項(xiàng)，北美、美國(guó)和南亞各1項(xiàng)。主要研究的是多藥結(jié)核病、乙型肝炎、非霍奇金淋巴瘤、復(fù)發(fā)或難治性B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞白血病、白血病、淋巴瘤等。 最近的臨床試驗(yàn)表明，γδT細(xì)胞在治療環(huán)境中正變得越來(lái)越明顯。例如γδT細(xì)胞在泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤中顯示出有效的作用，一些試驗(yàn)已經(jīng)證明了基于γδT細(xì)胞的免疫治療的安全性和有效性。Bennouna等報(bào)告了6名（60%）接受γδT細(xì)胞治療的轉(zhuǎn)移性腎癌患者的病情穩(wěn)定（SD）。Mattarollo等展示了使用Vγ9Vδ2T細(xì)胞、化療藥物、雙膦酸鹽和唑來(lái)膦酸鹽對(duì)實(shí)體瘤衍生細(xì)胞具有高水平的細(xì)胞毒性。此外，γδT細(xì)胞還調(diào)節(jié)其他免疫和非免疫細(xì)胞。Carding等進(jìn)一步證明了γδT細(xì)胞作為關(guān)鍵的早期反應(yīng)者和細(xì)胞因子產(chǎn)生者的作用。 腫瘤免疫學(xué)的最新進(jìn)展證實(shí)，免疫抑制細(xì)胞和免疫檢查點(diǎn)系統(tǒng)在抑制癌癥患者腫瘤免疫反應(yīng)中的重要作用。多項(xiàng)試驗(yàn)證明，使用γδT細(xì)胞進(jìn)行免疫治療是安全和耐受性良好的。雖然基于γδT細(xì)胞的免疫療法有值得開(kāi)發(fā)的優(yōu)勢(shì)，但仍有一些障礙需要克服。免疫治療可能會(huì)引起明顯的不良反應(yīng)，如活化的γδT細(xì)胞產(chǎn)生的促炎細(xì)胞因子，會(huì)引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)，γδT細(xì)胞免疫治療的臨床療效有待進(jìn)一步評(píng)估。將新出現(xiàn)的治療方法與現(xiàn)有的治療方法相結(jié)合，可以最大限度地減少未來(lái)免疫重建的潛在副作用。嚴(yán)重不良反應(yīng)和風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)通過(guò)受控的人體臨床試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估。尋找更好的抗原在體外刺激γδT細(xì)胞，以便為過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移準(zhǔn)備大量的細(xì)胞。最后，需要用聯(lián)合的腫瘤靶向抗體來(lái)克服主要挑戰(zhàn)，γδT細(xì)胞和腫瘤靶向抗體可能成為未來(lái)腫瘤免疫治療的重要手段。 此外，截至2020年上半年，中國(guó)臨床試驗(yàn)注冊(cè)中心顯示，CIK/DC-CIK細(xì)胞治療的相關(guān)臨床研究有22項(xiàng)；NK細(xì)胞治療的臨床研究涉及34項(xiàng)；TIL細(xì)胞治療的臨床研究共1項(xiàng)；關(guān)于γδT細(xì)胞治療的臨床研究共5項(xiàng)。 2 細(xì)胞治療常見(jiàn)種類概述 CIK細(xì)胞概述 CIK細(xì)胞是20世紀(jì)90年代首次發(fā)現(xiàn)的一種異質(zhì)細(xì)胞群，在其終末分化的CD3+CD56+亞群中結(jié)合了T細(xì)胞和NK細(xì)胞的表型，具有非主要組織相容性復(fù)合體（MHC）限制性的腫瘤殺傷活性。CIK細(xì)胞是將人外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外由多種細(xì)胞因子（如IFN-γ、IL-2、抗CD3單抗）共培養(yǎng)后獲得，能分泌高濃度的IL-2、IL-6、凋亡相關(guān)因子配體（FasL）、TNF、IFN-γ等多種具有直接細(xì)胞毒活性或抑制作用的細(xì)胞因子，具有增殖快、活性高、殺瘤譜廣等特點(diǎn)。 CIK細(xì)胞抗腫瘤的機(jī)制主要包括：
CIK細(xì)胞在最初的臨床研究中提供了令人鼓舞的結(jié)果，并在與標(biāo)準(zhǔn)治療程序相結(jié)合時(shí)顯示出協(xié)同抗腫瘤作用。研究證實(shí)CIK細(xì)胞治療1～2周后，患者外周血中CD3、CD4、CD4/CD8等T淋巴細(xì)胞均有不同程度的升高，淋巴細(xì)胞因子分泌增多，淋巴細(xì)胞功能增強(qiáng)，從而激活機(jī)體免疫系統(tǒng)，提高機(jī)體免疫功能。 目前，CIK細(xì)胞的培養(yǎng)條件已經(jīng)得到了廣泛的改善，特別是應(yīng)用IL-15代替IL-2或與IL-2一起應(yīng)用的研究顯示，CD56+CIK細(xì)胞可以在更短的時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生；與單獨(dú)使用IL-2擴(kuò)增的細(xì)胞相比，表現(xiàn)出更強(qiáng)的細(xì)胞毒活性。 DC-CIK細(xì)胞治療 DC是已知功能最強(qiáng)的專業(yè)抗原提呈細(xì)胞，具有激活CD4+輔助T細(xì)胞和CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞的能力。DC按來(lái)源分為髓系和淋巴系兩大類。DC分布廣泛但數(shù)量很少，約占人外周血單個(gè)核數(shù)量的1%。DC按功能分為未成熟DC和成熟DC，未成熟DC在外來(lái)抗原刺激后，其表面標(biāo)志物發(fā)生改變，形成成熟的DC。成熟DC抗原提呈能力和啟動(dòng)免疫應(yīng)答能力增強(qiáng)，分泌的因子刺激T淋巴細(xì)胞發(fā)揮免疫效應(yīng)。 DC和CIK細(xì)胞是腫瘤免疫治療兩種重要細(xì)胞。DC-CIK是指將兩者在體外共同培養(yǎng)，既促進(jìn)DC成熟，又加強(qiáng)了CIK細(xì)胞殺瘤作用。 DC-CIK細(xì)胞主要通過(guò)以下機(jī)制抗腫瘤：DC與CIK共培養(yǎng)過(guò)程中，DC表面高表達(dá)HLA-DR、CD40、CD80，其與CIK高表達(dá)的相應(yīng)共刺激分子受體結(jié)合，促使IL-12、IL-2及IFN-γ等細(xì)胞因子分泌量增加，促使CIK細(xì)胞增殖。高水平的IL-12刺激CIK細(xì)胞高表達(dá)CD56+，增強(qiáng)CIK細(xì)胞殺瘤作用。DC-CIK共同培養(yǎng)還可以降低具有較強(qiáng)免疫抑制作用的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞CD4+CD25+Treg細(xì)胞及IL-10分泌量，弱化其抗腫瘤抑制作用；還可以抑制hTERT蛋白表達(dá)，降低端粒酶活性，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。 CIK細(xì)胞被認(rèn)為是腫瘤免疫治療的理想候選細(xì)胞類型。大量的基礎(chǔ)研究和臨床研究表明，CIK治療惡性腫瘤是安全可行的。CIK與免疫學(xué)或基因工程方法的結(jié)合已經(jīng)被用來(lái)改善CIK的效果（圖1），如CIK聯(lián)合嵌合抗原受體（CAR），即CAR-CIK；CIK聯(lián)合DC，即DC-CIK；CIK細(xì)胞聯(lián)合納米材料；未來(lái)CIK細(xì)胞的應(yīng)用將具有良好的治療前景。
NK細(xì)胞治療 NK細(xì)胞在機(jī)體免疫監(jiān)視和早期抗感染免疫過(guò)程中起重要作用，是抗瘤免疫的第一線細(xì)胞。與T細(xì)胞不同，NK細(xì)胞以MHC不受限制的方式識(shí)別靶點(diǎn)，這些細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出很強(qiáng)的細(xì)胞毒活性，而不需要事先的致敏或免疫，并產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，導(dǎo)致隨后的過(guò)繼免疫系統(tǒng)的激活。NK細(xì)胞占單個(gè)核外周血細(xì)胞的5%～20%，在表型上通過(guò)CD16或CD56的存在以及CD3和CD19的缺失來(lái)定義。 NK細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞表面的受體識(shí)別靶細(xì)胞，這種受體可以被各種條件抑制或刺激。要激活NK細(xì)胞，必須刺激受體。到目前為止已知的NK細(xì)胞作用機(jī)制：
在干擾素的作用中，必須強(qiáng)調(diào)以下幾點(diǎn)：通過(guò)刺激抗血管生成因子抑制體外細(xì)胞增殖，間接減緩體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)；增加腫瘤細(xì)胞對(duì)穿孔素和凋亡作用的敏感性；消除肉瘤和甲基膽蒽（致癌化學(xué)物質(zhì)）誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)移；通過(guò)T淋巴細(xì)胞刺激DC細(xì)胞，從而間接促進(jìn)腫瘤控制（圖2）。
NK細(xì)胞過(guò)繼性免疫療法是細(xì)胞生物治療方法之一。該方法是向腫瘤患者回輸體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的NK細(xì)胞，在機(jī)體中直接或間接殺傷腫瘤細(xì)胞，從而達(dá)到腫瘤治療的目的。 體外擴(kuò)增NK細(xì)胞的過(guò)繼細(xì)胞治療具有重要的應(yīng)用價(jià)值和前景。各種細(xì)胞來(lái)源，包括外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）、多能干細(xì)胞和NK細(xì)胞系，已經(jīng)被用于產(chǎn)生NK細(xì)胞。特別是從同種異體PBMC擴(kuò)增的NK細(xì)胞比沒(méi)有擴(kuò)增的NK細(xì)胞顯示出更好的療效。使用NK細(xì)胞的免疫治療是一種不依賴于HLA介導(dǎo)的腫瘤抗原識(shí)別的特異性過(guò)繼性免疫治療。自體和同種異體NK細(xì)胞都可以用于過(guò)繼免疫治療，因?yàn)樗鼈兊陌踩院湍褪苄砸驯蛔C明。隨著腫瘤治療模式的不斷更新，過(guò)繼性細(xì)胞免疫治療在腫瘤綜合治療中的作用越來(lái)越受到重視，NK細(xì)胞相關(guān)的臨床研究在全球廣泛開(kāi)展，用于治療造血系統(tǒng)惡性腫瘤（如白血病、淋巴瘤和多發(fā)性骨髓瘤）和實(shí)體腫瘤（如黑色素瘤、卵巢癌、肺癌、結(jié)直腸癌和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤）。 由于NK細(xì)胞在一線免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用且作用迅速，因此越來(lái)越多的研究集中在以NK細(xì)胞為基礎(chǔ)的腫瘤免疫治療上。以NK細(xì)胞為基礎(chǔ)的癌癥治療的主要方法包括細(xì)胞因子、抗體，以及通過(guò)改善NK細(xì)胞的持續(xù)性、活化、數(shù)量或腫瘤細(xì)胞靶向性而過(guò)繼轉(zhuǎn)移體外NK細(xì)胞（圖3）。
TIL細(xì)胞治療 TIL的過(guò)繼細(xì)胞療法最早是由羅森博格的團(tuán)隊(duì)于1988年開(kāi)發(fā)的。TIL的過(guò)繼細(xì)胞療法利用內(nèi)源性TIL，從手術(shù)切除的腫瘤分選出淋巴細(xì)胞，體外擴(kuò)增，然后重新注入患者體內(nèi)。 在20世紀(jì)80年代末，研究表明黑色素瘤中的TIL可以在IL-2存在的情況下生長(zhǎng)，并且它們可以識(shí)別自體腫瘤細(xì)胞。這一發(fā)現(xiàn)是黑色素瘤TIL的過(guò)繼細(xì)胞療法的基礎(chǔ)，并指出TIL治療黑色素瘤的療效可能與腫瘤特異性基因突變所產(chǎn)生的新抗原特異性T細(xì)胞有關(guān)。單中心回顧性研究中評(píng)估TIL治療晚期黑色素瘤患者的有效性和安全性結(jié)果顯示，在安全性方面，沒(méi)有嚴(yán)重不良反應(yīng)的報(bào)道，治療反應(yīng)包括CR、部分緩解、穩(wěn)定2例、進(jìn)展6例。 Hall等在人胰腺腫瘤TIL的擴(kuò)增試驗(yàn)中得出，從胰腺腫瘤中擴(kuò)增出來(lái)的TIL具有功能性，并能對(duì)胰腺腫瘤相關(guān)抗原產(chǎn)生應(yīng)答。PD-1阻斷、4-1BB刺激、CD8+T細(xì)胞富集是提高TIL產(chǎn)量和腫瘤反應(yīng)性的有效策略。這些結(jié)果支持了使用TIL治療胰腺癌的過(guò)繼細(xì)胞治療策略的發(fā)展。 一份關(guān)于骨髓浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞過(guò)繼免疫療法治療多發(fā)性骨髓瘤患者的報(bào)告顯示，疾病負(fù)擔(dān)顯著減輕，無(wú)進(jìn)展生存率增加，表明這一概念已擴(kuò)展到血液系統(tǒng)惡性腫瘤。幾項(xiàng)研究已經(jīng)證明TIL的數(shù)量與患者預(yù)后之間存在明顯的相關(guān)性。TIL的數(shù)量和TIL表型，特別是CD8+細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的數(shù)量，可以預(yù)測(cè)許多腫瘤類型的無(wú)進(jìn)展生存率和總生存率的增加，這些腫瘤包括黑色素瘤、頭頸部鱗癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌和卵巢癌。盡管TIL能夠進(jìn)入腫瘤組織并識(shí)別腫瘤特異性抗原，但由于高度的免疫抑制環(huán)境，它們的數(shù)量往往很少，無(wú)法控制腫瘤的生長(zhǎng)。 TIL的過(guò)繼細(xì)胞療法在過(guò)去的10年里作為抗癌治療越來(lái)越受到人們的關(guān)注。即T細(xì)胞從自體新鮮腫瘤組織中分離獲取，經(jīng)體外活化和廣泛擴(kuò)增后回輸?shù)交颊唧w內(nèi)（圖4）。最終成熟的TIL細(xì)胞制品由CD8+和CD4+T細(xì)胞以高度可變的比率，以及占比非常小的γδT細(xì)胞組成。傳統(tǒng)上，TIL治療的療效主要?dú)w因于CD8+T細(xì)胞；然而，新的研究表明，在TIL制劑中也可以識(shí)別出腫瘤反應(yīng)性CD4+T細(xì)胞。許多獲得長(zhǎng)期完全緩解的患者更多的是接受了以CD4+T細(xì)胞為主的TIL產(chǎn)品的治療。
γδ T細(xì)胞治療 免疫治療是開(kāi)發(fā)新型抗腫瘤藥物的研究熱點(diǎn)之一，過(guò)繼免疫治療是通過(guò)體外擴(kuò)增免疫效應(yīng)細(xì)胞，將激活的免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)移到宿主體內(nèi)，靶向腫瘤細(xì)胞或刺激免疫反應(yīng)清除腫瘤細(xì)胞。 T淋巴細(xì)胞主要有兩類：αβT和γδT細(xì)胞。這兩種T細(xì)胞的不同之處在于它們表達(dá)不同的細(xì)胞表面抗原受體。大多數(shù)αβT細(xì)胞識(shí)別具有MHC I類或II類的抗原肽。 在外周血液中，αβT細(xì)胞約占95%，而γδT細(xì)胞僅占總CD3+細(xì)胞的5%。γδT細(xì)胞具有分泌豐富細(xì)胞因子的能力，它們對(duì)多種惡性腫瘤都有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性（圖5）。γδT細(xì)胞產(chǎn)生的主要細(xì)胞因子是IFN-γ，在抗病毒、抗細(xì)菌和抗腫瘤免疫中發(fā)揮著重要作用，是抗腫瘤免疫應(yīng)答中的中樞性細(xì)胞因子。因此，γδT細(xì)胞已成為腫瘤免疫治療的引人關(guān)注的效應(yīng)細(xì)胞。γδT細(xì)胞具有不受限制的MHC裂解活性，可以對(duì)細(xì)菌、病毒和腫瘤產(chǎn)生反應(yīng)。因此，它們已成為過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移治療的有吸引力的靶細(xì)胞。
以免疫系統(tǒng)對(duì)抗腫瘤是一種治療措施，盡管進(jìn)展緩慢，成功有限。γδT細(xì)胞主要通過(guò)產(chǎn)生促凋亡分子和炎性細(xì)胞因子或通過(guò)依賴于抗原受體（TCR）的途徑來(lái)調(diào)節(jié)抗腫瘤反應(yīng)。在目前的臨床試驗(yàn)中，利用γδT細(xì)胞進(jìn)行抗腫瘤治療的主要障礙是γδT細(xì)胞的擴(kuò)增數(shù)量有限，缺乏一種連續(xù)可靠的方法。幾項(xiàng)研究報(bào)告指出，擴(kuò)增γδT細(xì)胞最有效和最廣泛使用的方法是利用磷酸化抗原或抗γδT細(xì)胞受體抗體。由于γδT細(xì)胞在體外不受限制的裂解MHC活性，因此可廣泛應(yīng)用于抗腫瘤治療。在幾項(xiàng)臨床試驗(yàn)中，γδT細(xì)胞能夠在不同的腫瘤中發(fā)揮更好的療效，包括腎癌、肺癌、黑色素瘤、乳腺癌等。在體外，γδT細(xì)胞對(duì)腫瘤有反應(yīng)，而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)反應(yīng)，這也是很獨(dú)特的。 3 未來(lái)發(fā)展趨勢(shì) 細(xì)胞免疫治療作為一種新興的腫瘤治療模式，與傳統(tǒng)的腫瘤治療方法相比，因具有安全性、針對(duì)性、持久性、全身性、徹底性以及適應(yīng)證廣等特點(diǎn)備受關(guān)注。免疫細(xì)胞治療經(jīng)過(guò)長(zhǎng)足的發(fā)展，已經(jīng)在多種腫瘤的治療上發(fā)揮了很好的療效，給人們帶來(lái)了曙光。然而，如何進(jìn)一步提高療效與特異性，擴(kuò)大適應(yīng)證，是未來(lái)研究的方向。 DC是專職抗原提呈細(xì)胞，負(fù)責(zé)對(duì)抗原進(jìn)行加工處理后提呈給T細(xì)胞，誘導(dǎo)T細(xì)胞的活化和增殖，激發(fā)有效的免疫應(yīng)答。由于DC在免疫應(yīng)答過(guò)程中的核心地位，而且DC在體外培養(yǎng)成功，使其成為腫瘤免疫治療中最重要的力量之一。2010年DC疫苗成為第一個(gè)FDA批準(zhǔn)的治療性腫瘤疫苗。目前看來(lái)，單純DC疫苗雖有療效但仍須改進(jìn)，需要尋找更為合適的腫瘤抗原、更有效地促進(jìn)DC活化的方法或者與其他方法聯(lián)合使用將是DC未來(lái)的一個(gè)發(fā)展方向。 此外，CIK細(xì)胞在體內(nèi)外對(duì)多種腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出強(qiáng)大的抗腫瘤細(xì)胞毒性，有研究發(fā)現(xiàn)將DC細(xì)胞和CIK細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí)，T細(xì)胞促使DC進(jìn)一步成熟后釋放大量IL-12、IFN-γ等細(xì)胞因子，使CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒活性明顯增強(qiáng)，且細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)上升，極大程度地提高了殺傷腫瘤細(xì)胞效率，且無(wú)明顯毒副作用，使治療達(dá)到1＋1＞2的效果。未來(lái)研究DC-CIK聯(lián)合應(yīng)用治療多種癌癥將成為細(xì)胞免疫治療的另外一個(gè)方向。 如何最佳、最有效地培養(yǎng)出DC-CIK細(xì)胞，培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞因子添加多少種和多少劑量；建立DC-CIK細(xì)胞免疫治療臨床路徑，比如根據(jù)患者的腫瘤類型和臨床分期尋找聯(lián)合應(yīng)用的最好組合，明確DC-CIK回輸應(yīng)用劑量，探討經(jīng)濟(jì)實(shí)用的免疫監(jiān)測(cè)指標(biāo)和臨床療效評(píng)價(jià)體系是今后研究的方向。 如何提高NK細(xì)胞在體內(nèi)的存活時(shí)間，更高效的擴(kuò)增，如何增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別與殺傷能力，如何在GMP水平生產(chǎn)大規(guī)模的NK細(xì)胞等。隨著前沿生物醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，相信會(huì)不斷解決存在的問(wèn)題。例如開(kāi)發(fā)CAR-NK細(xì)胞技術(shù)，通過(guò)對(duì)CAR-NK細(xì)胞和武裝-NK細(xì)胞等細(xì)胞進(jìn)行基因修飾，可以實(shí)現(xiàn)NK細(xì)胞的特異性靶向或增強(qiáng)細(xì)胞毒性。為NK細(xì)胞的靶向治療提供令人鼓舞的臨床應(yīng)用前景。 美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院外科分院在20世紀(jì)90年代首次展示了TIL治療黑色素瘤患者的良好臨床效果，隨后在世界不同地點(diǎn)進(jìn)行的多項(xiàng)臨床試驗(yàn)證實(shí)了這些結(jié)果。在這些試驗(yàn)中，一直可以觀察到40%～70%的客觀反應(yīng)。隨著過(guò)繼細(xì)胞療法與TIL聯(lián)合應(yīng)用范圍的擴(kuò)大，TIL生產(chǎn)的優(yōu)化（包括T細(xì)胞亞群的選擇）、臨床方案的調(diào)整（包括淋巴清除準(zhǔn)備方案和IL-2的作用）顯得尤為重要。 在個(gè)性化癌癥醫(yī)學(xué)的時(shí)代，使用TIL的過(guò)繼細(xì)胞治療代表了一個(gè)獨(dú)特的機(jī)會(huì)，以探索患者免疫系統(tǒng)的的多樣性和特異性。有效和安全的T細(xì)胞過(guò)繼免疫治療的靶點(diǎn)非常有限。提示TIL治療黑色素瘤的療效可能與腫瘤特異性基因突變所產(chǎn)生的新抗原特異性T細(xì)胞有關(guān)。尋找新的抗原將有利于開(kāi)發(fā)一種“量身定做”的癌癥免疫治療方案。在下一代測(cè)序技術(shù)的最新進(jìn)展的支持下，在較短的時(shí)間內(nèi)以相對(duì)合理的成本在單個(gè)患者中檢測(cè)到每種癌癥特有的突變是可能的。以新抗原為靶點(diǎn)的免疫治療有可能在不久的將來(lái)成為癌癥患者治療的現(xiàn)實(shí)選擇。TIL與新的免疫療法聯(lián)合治療的療效有待進(jìn)一步研究。 雖然基于γδT細(xì)胞的免疫療法有值得開(kāi)發(fā)的優(yōu)勢(shì)，但目前仍存在一定的問(wèn)題急需解決，如免疫治療可能會(huì)引起明顯的不良反應(yīng)；活化的γδT細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子，可能會(huì)引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)等。γδT細(xì)胞免疫治療的臨床療效有待進(jìn)一步評(píng)估。將新出現(xiàn)的治療方法與現(xiàn)有的治療方法相結(jié)合，可以最大限度地減少未來(lái)免疫重建的潛在副作用。嚴(yán)重不良反應(yīng)和風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)通過(guò)受控的人體臨床試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估。尋找更好的抗原在體外刺激γδT細(xì)胞，以便為過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移準(zhǔn)備大量的細(xì)胞。最后，需要用聯(lián)合的腫瘤靶向抗體來(lái)克服主要挑戰(zhàn)。γδT細(xì)胞和腫瘤靶向抗體可能成為未來(lái)腫瘤免疫治療的重要手段。 免疫細(xì)胞治療經(jīng)過(guò)長(zhǎng)足的發(fā)展，已經(jīng)在多種腫瘤的治療上取得了很好的療效。然而，如何進(jìn)一步提高療效與特異性，擴(kuò)大適應(yīng)證，是未來(lái)研究的方向。其中，對(duì)于免疫細(xì)胞的工程化修飾，如何簡(jiǎn)便可行并具有腫瘤與患者個(gè)體化特點(diǎn)，尚需進(jìn)一步優(yōu)化；進(jìn)一步深入研究免疫細(xì)胞回輸體內(nèi)之后遷移過(guò)程的分子機(jī)制以設(shè)法將其引導(dǎo)至腫瘤部位或者免疫激發(fā)器官，也是值得探索的一個(gè)方向；對(duì)于腫瘤細(xì)胞如何逃逸免疫監(jiān)視與殺傷機(jī)制的深入研究，可以提供更多的腫瘤免疫治療靶點(diǎn)。同時(shí)，結(jié)合精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)發(fā)展，篩選生物標(biāo)志物，從而可以預(yù)篩選過(guò)繼細(xì)胞治療可以發(fā)揮作用的腫瘤患者，將對(duì)于腫瘤的免疫細(xì)胞治療具有非常重要的指導(dǎo)意義。 來(lái)源：免疫細(xì)胞治療臨床研究及相關(guān)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀與未來(lái)發(fā)展趨勢(shì) [J]. 藥物評(píng)價(jià)研究, 2021, |
